产品说明书：
PfAgo 核酸内切酶
产品信息
产品名称：PfAgo 核酸内切酶 货号：PFA002 规格：50 T
产品概述
液体酶产品组分
组分 | 体积 | 数量 |
PfAgo Endonuclease（100 U/mg） | 200 μL（50T） | 1支 |
PfAgo Endonuclease Reaction Buffer（10x） | 120 μL | 1支 |
热稳定
95℃ 1小时，酶活性不损失。
运输与保存方法
-20℃及以下运输及保存，长期保存建议放-80℃。
效期
-20℃及以下 24 个月。
单位定义
95 ℃反应条件下，每分钟催化 0.1 nmol 靶序列核酸所需的 PfAgo 量，定义为 1 个酶活力单位(U)。
质量控制
项目 | 标准 | 方法 |
产品外观 | 澄清透明 | 目视检查 |
活性 | 标示值 | 荧光定量PCR法 |
纯度 | ≥ 90% | 中国药典2020版第四部SDS-PAGE法（通则0541） |
核酸内切酶残留 | 无检出 | 20U酶与pUC19DNA底物37℃孵育1小时，用1%的琼脂糖电泳检测，底物无降解 |
核酸外切酶残留 | 无检出 | 20U酶与ssDNA底物37℃孵育1小时，用16%尿素变形电泳检测，底物无降解 |
宿主DNA残留 | < 10拷贝/0.5μg酶 | 荧光定量PCR法 |
实验流程
体外切割单链 DNA 操作方法：
1. 按顺序配置反应体系
试剂 | 体积 |
10 μM ssDNA | 2 μL |
10 μMguide DNA | 4 μL |
40 mM Mn2+ | 1 μL |
Reaction Buffer(10x) | 2 μL |
PfAgo（200 U/μL） | 4 μL |
Nuclease-free H2O | up to 20 μL |
▲一般使用 20 μL 体系，但也可以等比例放大。
▲实验前请根据使用说明用无核酸酶水将 ssDNA 与 guide DNA 稀释到相应浓度。
▲请使用无核酸酶水的耗材与试剂。
2. 95℃孵育 30 min，每隔 15S 采集荧光信号（图一）。
3. 反应产物可直接进行核酸胶电泳分析（图二）。
▲ 如果不立即电泳，可以加入 EDTA 终止反应。
结果图示
自备材料
试剂：Nuclease-free H2O
guide DNA
ss DNA
仪器：PCR仪器、金属浴或水浴锅
RNase free EP管
如需购买请联系：18621272896
